Институт за контрол на ветеринарномедицински продукти
|
Версия: 02/11.06.2009г.
|
Лист
|
Стандартна оперативна процедура 030
ИЗВЪРШВАНЕ НА РЕАКЦИЯ ПРЕДМЕТНА АГЛУТИНАЦИЯ
|
Изменение ......./……………
|
-
ЦЕЛ
Целта на тази стандартна оперативна процедура е установяване на неизвестни антитела в кръвни серуми от животни, с известни антигени /диагностикуми/, както и за идентифициране на неизвестни антигени с известни стандартни и имунни серуми,при изпитване на бактериални имунологични ВМП за специфичност и имуногенност.
-
ОБХВАТ
Оценка на напрежението на имунитета, чрез свързване на антиген и антитяло и проследяване активността на ИВМП, като скрининг тест.
-
ЧЕСТОТА НА ПРИЛОЖЕНИЕ
Методът се използва при ИВМП, за доказване на наличие на специфични антитела в кървните серуми на животните преди изпитването им за ефикасност.
-
АПАРАТУРА И МАТЕРИАЛИ
Апаратура: Центрофуга, хладилник, автоклав, инкубатор, микроскоп,
Помощни материали: стативи, автоматични пипети за накапване, епендорф епруветки, предметни стъкла, платинено ухо
Консумативи: физиологичен разтвор, бульони, агар, антигени-живи или убити бактериални суспензии, серуми от ваксинирани животни, контролни нулеви серуми, наситени аглутиниращи поливалентни серуми; групови ,типови и факторни.
-
ОТГОВОРНОСТИ
Ръководителят на лабораторията носи отговорност за извършване на реакцията.
-
ПРОЦЕСНА КАРТА
-
ПРОЦЕДУРА
Действие
|
От кого се извършва
|
Кога се извършва
|
Как се извършва
|
1. Поставяне на серум
|
лаборант
|
При доказване на наличие на специфични антитела в кървните серуми на животните преди изпитването им за ефикасност
|
Върху добре почистено предметно стъкло се поставя капка неразреден серум
|
2. Поставяне на антиген1
|
лаборант
|
След поставяне на серум
|
В непосредствена близост до серумът се накапва една капка от неразредения добре суспендиран антиген
|
3.Смесване и разтилане
|
лаборант
|
След поставяне на серум и натиген
|
Двете капки (серум и антиген) се смесват внимателно с помощта на платинено ухо и се разтилат върху повърхност с диаметър около 1 см.
|
4. Получаване на равномерна суспензия
|
лаборант
|
След смесване
|
Предметното стъкло се разклаща внимателно с въртеливи движения.
|
5. Отчитане на резултатите
|
Инспекторът, извършващ анализа
|
След полчване на равномерна суспензия
|
С невъоръжено око след 1 до 2 минути. При положителен резултат, се образуват флокули и избистряне на течността.
При отрицателен резултат не се появява аглутинация и суспензията върху предметното стъкла остава непроменена
|
1 За антиген се използват:
- живи култури от щамове микроорганизми,използвани в хиперимунизацията или при изготвянето на ваксини. Те се посяват на твърди хранителни среди и култивират за 24 часа на 37 С. Агаровите култури се отмиват с физ.разтвор.
- убити бактериални суспензии/диагностикуми/, приготвени чрез химични и термични обработки според термостабилността на антигена / О, Н и К антигени/.
Разработил:
ИННОВА ЕООД
|
Утвърдил:
(име, подпис)
|
01/06/2009 г.
|
11/06/2009 г.
|
Сподели с приятели: |