Цел определя се минималната подтискаща концентрация /мпк/ на даден антибиотик спрямо микроорганизмите. Обхват

Изтегляне 56.82 Kb.

Дата	10.10.2017
Размер	56.82 Kb.
	#32084

Институт за контрол на ветеринарномедицински продукти	Версия: 02/ 11.06.2009г.	Лист
Стандартна оперативна процедура 050 ОПРЕДЕЛЯНЕ НА ЧУВСТВИТЕЛНОСТТАНА МИКРОБИТЕ КЪМ АНТИБИОТИЦИ В ТВЪРДИ ХРАНИТЕЛНИ СРЕДИ	Изменение ......./……………	Лист

ЦЕЛ

Определя се минималната подтискаща концентрация /МПК/ на даден антибиотик спрямо микроорганизмите.

ОБХВАТ

Определяне активността на даден антибиотик срещу изследваните микроорганизми.

МАТЕРИАЛИ

Материали: стерилни епруветки, пипети, ерленмаерови колби, петриеви панички, калибрирано платиново ухо, автоклав, Кох, аналитична везна

Консумативи: Обикновен агар, обикновен бульон, антибиотици, щамове микроорганизми

4. МЕТОД

При анализа на чувствителността на микроорганизмите към антибиотици се използват субстанции от съответните антибиотици с обявено съдържание на активно вещество за 1 мг субстанция. Активността трябва да бъде изразена в мкг/мл или UI/ml. Субстанциите антибиотици трябва да се съхраняват при температура 4^оС и при условия, непозволяващи овлажняване.

ПРОЦЕСНА КАРТА

ПРОЦЕДУРА

Действие	От кого се извършва	Кога се извършва	Как се извършва
1. Претегляне	лаборант	В началото на процедурата	Субстанциите от съответните антибиотици се претеглят на аналитична везна.
2. Разтваряне	лаборант	След претегляне на атибиотиците	Разтварят се в стерилна дестилирана вода, така че да се получи желаната концентрация активно вещество. Подходяща изходна концентрация на активното вещество за всички антибиотици е 1280 мкг/мл. Използва се изходно разреждане 512 мкг/мл до 0,031 мкг/мл за Грам /-/ и от 128 мкг/мл до 0,25 мкг/мл за Грам/+/ микроорганизми.
3. Изчисляване	лаборант	След разтваряне на антибиотиците във вода	За една петриева паничка с диаметър 9 см са необходими 20 мл агар.
4. Приготвяне на разреждане на агар	лаборант	След изчисляване	Разрежданията се правят петкратно по-концентрирани, като към 9 части агар се прибавя една част разтвор.
5. Избиране на оптимална температура	лаборант	След приготвяне на агара	Ако агарът е много горещ, някои антибиотици могат да се инактивират, а ако е много охладен съществува опасност антибиотика да не се размеси равномерно
6. Прибавяне на антибиотик	лаборант	След охлаждане на агара	Към разтопения и охладен агар, разпределен по колби и темпериран до 48-50^оС се прибавят съответните разреждания на антибиотика в съотношение 1 част разтвор на антибиотика и 9 части агар. Приготвя се и една петра без антибиотик.
7. Размесване	лаборант	След прибавяне на антибиотика към агара	Размества се внимателно чрез въртеливи движения
8. Изливане	лаборант	След размесване	Излива се веднага в петрите и се оставя да се втвърди върху нивелирана повърхност.
9. Втвърдяване	лаборант	След изливане	Така приготвените петри, затворени в пластмасови торбички, могат да се съхраняват в хладилник за рутинна работа за 1 седмица
10. Култивиране на микроорганизми	лаборант	Предварително, за едно денонощие	Микроорганизмите, които подлежат на изпитване, се култивират на течни хранителни среди
11. Разреждане	лаборант	След култивиране на микроорганизмите	Микробната култура на подлежащия за изпитване микробен щам в логаритмична или ранна стационарна фаза се разрежда в бульон до 10⁶ микробни клетки/мл за Грам /-/ и 10³ за Грам /+/.
12. Подсушаване	лаборант	След разреждане	Повърхността на петрите се подсушава
13. Нанасяне на инокулум	лаборант	След подсушаване	Инокулумът се нанася под формата на петно с калибрирано платиново ухо в обем от 0,001 до 0,002 мл. Диаметърът на петното е с размери от 5 до 8 мм и съдържа 10⁴ микробни тела. Инокулумите не се разсяват, така че на една петра могат да бъдат изпитани повече щамове.
14. Култивиране	лаборант	След нанасяне на инокулум	Мястото на инокулума се отбелязва по шаблон. Култивира се при температура 37^оС за 24 часа.
15. Отчитане на резултат	Специалист, извършващ анализа	След 24 часа	Отчита се пълната задръжка на растеж /МПК

Разработил: ИННОВА ЕООД	Утвърдил: (име, подпис)

01/06/2009 г.	11/06/2009 г.

Каталог: SOP%20final
SOP%20final -> Процедурата за калибриране се прилага периодично за да възпроизведе и контролира основните метрологични характеристики на метода
SOP%20final -> Hp/Compaq computer system 6GHz piv processor, 512 mb ram, 80 gb hdd, 3
SOP%20final -> Цел целта на тази стандартна оперативна процедура е защита на работещите от рискове, свързани с експозиция на биологични агенти при работа с тях. Обхват
SOP%20final -> Цел тази стандартна оперативна процедура регламентира микробиологичния метод за количествено определяне концентрацията на антибиотици. Обхват
SOP%20final -> Оценка на напрежението на имунитета, чрез свързване на антиген и антитяло и проследяване активността на ивмп
SOP%20final -> За оценка на ефикасността на ивмп и определяне напрежението на имунитета в серуми от опитни животни
SOP%20final -> Оценка на напрежението на имунитета, чрез свързване на антиген и антитяло и проследяване активността на ивмп, като скрининг тест
SOP%20final -> Цел тази стандартна оперативна процедура се прилага за поддържането на референтни бактериални щамове за нуждите на лаборатория Микробиология, чрез препосяването им през определени периоди от време в подходящи хранителни среди обхват
SOP%20final -> За контрол на качеството на почистването и дезинфекцията на лабораториите, помощните помещения, облекло и ръце на персонал работещ в тях, редовно се извършват микробиологични изследвания
SOP%20final -> Цел целта на тази стандартна оперативна процедура е да опише методът на изследване за откриване на специфични антитела срещу говеждия пестивирус (bvdv) в проби от серум или мляко. Обхват

Изтегляне 56.82 Kb.

Сподели с приятели: