Капилярна електрофореза (СЕ) Основни характеристики
страница 1/3 Дата 19.07.2022 Размер 1.52 Mb. #114811
CE Свързани:
2.SpectroscTerms ,
Избор на изкуствени зъби и естетика на съзъбието. Ортогнатно нареждане на изкуствените зъби по Гизи ,
tgtgesgesehgesh ,
gykygktyk Електрокинетична сепарационна техника, която включва прилагане на високо напрежение на капиляра от кварцово стъкло. Високото напрежение генерира електроосмотичен поток, а това изключва използването на помпа за придвижване на подвижната фаза, както е при течната хроматография. Разделянето при СЕ е комбинация между електрофореза и хроматография. Капилярна електрофореза (СЕ) Видове Капилярна зонова електрофореза разделянето се базира на разлика в размера и заряда на аналитите Мицеларна електрокинетична капилярна електрофореза (хроматография) Капилярна гел електрофореза Разделянето се базира на различния размер на аналитите, преминаващи през порите на гела, играещ роля на молекулно сито Капилярно изоелектрично фокусиране На капиляра (25-100 mm), напълнена с електролит, се прилага високо напрежение (10-30 kV). Краищата на капилярата са потопени в контейнери с електролит. Това осигурява провеждане на ел. ток във вътрешността на капилярата. В контейнерите с електролит са потопени електроди, за да се затвори ел. верига. В единия край на капилярата се въвежда малък обем проба. Другият край на капилярата е свързан с детектор. Прилагането на напрежение води до движение на йоните на пробата към съответния електрод, като при това те преминават през детектора. Графичният запис на сигнала на детектора като функция на времето представлява електрофореграмата. Принцип на метода (Ph. Eur. метод 2.2.47) Физичен метод за анализ, основаващ се на движение в капиляра на заредени аналити , разтворени в електролит под влияние на електирично поле. 2 основни процеса: електрофореза и електроосмоза Скоростта на движение на аналита в поле с интензитет Е се определя от: електрофоретичната подвижност на аналита електроосмотичния поток на буфера в капилярата Как се разделят аналитите при капилярната електрофореза (СЕ) 2 основни процеса (a) електрофореза: Електрофореза – насочено движение на йони в среда на електролит под действие на електрично поле катиони катод (-) аниони анод (+) Електрофоретичината подвижност (µep ) на аналита зависи от: електричен заряд, размер и форма на молекулата на аналита йонна сила, рН, вискозитет, компоненти на електролита , в който се движи аналита Как се разделят аналитите при капилярната електрофореза (СЕ) (б) електроосмоза Капилярата е от кварцово стъкло - съдържа силанолни групи Те променят заряда си в зависимост от рН на средата при ниско pH Si-OΘ→Si-OH незаредена стена на капилярата ↓ електроосмоза ↓ катиони в бислоя електроосмоза < електрофореза аниони анод при повишаване на pH Si-OH Si-O- стената на капилярата се зарежда отрицателно катиони в бислоя електроосмоза > електрофореза аниони → катод Вътрешната стена на кварцовата капиляра съдържа отрицателно заредени силанолни групи Тези отрицателни заряди по стените на капилярата привличат катиони от разтвора Образува се електричен бислой: неподвижни (-) заряди по стената и подвижни (+) заряди от разтвора електроосмотичен поток – генерира се при пропускане на разтвор на електролит през капиляра с постоянни заряди на стената влияе на движението и разделянето на аналита При прилагане на напрежение: катионите се движат към катода движение на течност в капилярата = електроосмотичен поток Скоростта на електроосмотичния поток зависи от плътността на зарядите по капилярната стена от силата на приложеното напрежение Сподели с приятели:
