Изпълнителна агенция по сортоизпитване, апробация и семеконтрол
Многокълнови семенни единици (МСЕ )
Изтегляне 3.01 Mb.
|
- Навигация на страницата:
- 5.2.7. Непокълнали семена
5.2.6. Многокълнови семенни единици (МСЕ )Семена, които са способни да продуцират повече от един кълн са МСЕ Няколко типа семенни единици могат да продуцират повече от един кълн:
Семена, непокълнали до края на периода на тестване при условията, дадени в Таблица 5А и се класифицират по следния начин: Твърди семена: които остават твърди в края на анализа, тъй като не са абсорбирали вода. Това е форма на латентност. Характерна е за много видове от Fabaceae (Leguminosae), но може да се прояви и при други семейства. Тези семена не са способни да поемат вода при условията на теста и остават твърди. Свежи семена: семена, различни от твърдите, които не са успели да покълнат, но остават чисти и здрави и имат способността да развият нормален кълн. Способни са да поглъщат вода при условията на теста, но кълнителния процес е блокиран. Мъртви семена: които в края на теста не са нито твърди, нито свежи, нито са образували част от кълна. Обикновено са меки, обезцветени, често мухлясяли и не показват никакви признаци на развитие на кълн. Други категории: в някои случаи празни и непокълнали семена могат да се категоризират по-нататък както е описано по-долу: Непокълналите семена могат да бъдат подразделени допълнително на: празни семена ( напълно празни или съдържащи остатъчна тъкан) семена без зародиш (съдържат свеж ендосперм или гаметофитна тъкан, в която няма нито ембрионална кухина, нито зародиш). семена, повредени от насекоми (съдържат ларви или имат други белези от нападение на насекоми, засягащи способността на семената да покълват). Описаните по-горе категории могат да възникнат при всякакъв вид семена, но по-често се срещат при дървесните видове 5.3. Основни принципи Тестът за кълняемост се провежда със семена от фракцията на чистото семе, освен когато се разрешава тестване на семената чрез претеглени повторения. Прилагат се дефинициите за чисто семе за съответния вид. Чистото семе може да бъде взето или от фракцията на чистото семе, пролучена при анализа на чистота, или от представителна фракция на средната проба. Когато семенната партида е била дражирана, трябва да се използва дефиницията за чисти дражета. Семената не трябва да се третират предварително, освен в случаите, когато това се прпоръчва в т. 5.7. Паралелен или дублиращ анализ е позволен и правилата за съобщаване на резултатите са същите както е дефинирано за повторните анализи в 5.7. Ако са предприети допълнителни тестове след каквото и да било предварително третиране, резултатът и третирането трябва да се отбележат под “други изследвания” в документа за лабораторен анализ и в сертификата. Семената по повторения се залагат при подходяща влажност и метод, посочени в табл.5А. След определения в табл.5А период се броят кълновете и семената от различните категории. 5.4. Субстрати 5.4.1. Дефиниция Субстратът, използван при тест кълняемост, е продукт, който е достатътъчно порьозен за да задържа въздух и вода и да осигурява контакт на семето и кореновата система с тях. 5.4.2. Обща спецификация За субстратите при тест кълняемост се прилагат следните общи спецификации: Вид: субстратът може да бъде хартия, пясък или органичен материал с добавки от минерални частици. Влагопоемност: частиците на субстрата трябва да имат задоволителен капацитет да задържат и позволяват движение на водата към семената и кълновете. Субстратът трябва да има съответната порьозност за да може до корените да достига съответното количество въздух, необходимо за оптималното им развитие. По принцип количеството на водата, с която се намокря съответния субстрат представлява процент спрямо максималната му влагопоемност. При необходимост, количеството вода може да се съобрази със съответен вид. рН : субстрата трябва да има рН от 6.0 до 7.5, като проверката се прави на намокрения субстрат. Проводимост : Наличието на соли трябва да е на максимално ниско ниво и да не превишава 40 милисименса на метър. Чистота и нетоксичност: субстратът трябва да е чист от семена, гъби, бактерии или токсични субстанции, които могат да окажат влияние на покълването на семената и на развитието и оценяването на кълновете. Повторно използване: субстратът може да се ползва само еднократно. Не се препоръчва използване след стерилизиране и др. Алтернативни проверки: когато е трудно да се проверят всички спецификации на субстрата е допустимо вместо определяне на проводимост да се проведе биологичен тест както този за токсичност. Биологичният тест може да замести само определяне на проводимост. Всички други проверки трябва да бъдат направени. 5.4.3. Характеристики на субстратите 5.4.3.1. Хартия Хартията може да е дървесна, памучна или друг вид пречистена растителна целулоза. Може да бъде филтърна, попивателна или др. Трябва да е такава че:
5.4.3.2. Пясък Пясъкът трябва да е относително хомогенен, в него да няма много дребни и много едри частици. Предпочита се пясък с кръгли песъчинки, без остри ръбове, които могат да наранят кълновете и окажат влияние на развитието им.
5.4.3.3. Органична среда Органичната среда е комбинация от органични и минерални частици в предварително зададена пропорция и отговаря на изискванията в т.5.4.2. Органични частици: фибри от торф, дървесни сърготинии др. с максимална големина 5 mm. Минерални частици: пъсък, перлит и др. Минералните частици трябва да съставляват около една пета от обема на органичната среда ( 20 обемни %). Препоръчителният им размер е такъв, че 90% от минералните частици да преминават през сито с размер 2 mm и да се задържат над сито 0.05 mm. 5.4.3.4. Вода За провеждане на анализите може да бъде използвана деминерализирана, дейонизирана, чешмяна или изворна вода. Чистота: водата използвана за намокряне на субстратите трябва да е достатъчно чиста от органични и неорганични онечиствания. рН: рН трябва да е от 6.0 до 7.5, като проверката се прави на субстрата. Когато рН на субстрата е извън предписаните граници трябва да има статистически обработени даннни, доказващи, че различното рН не оказва негативно влияние на резултатите от тестовете. 5.4.4. Контрол на качеството Всяка доставена партида, от който и да е субстрат, трябва да отговаря на физическите изисквания и да е свободна от токсични субстанции или нетоксични микроорганизми, които могат да окажат негативен ефект върху резултатите от тестовете. Характеристиките: вид, влагопоемност, рН, чистота и нетоксичност (липса на токсичен ефект и липса на негативен ефект от нетоксични микроорганизми) задължително се проверяват в лабораторията. За резултатите се изготвят писмени протоколи, които се съхраняват в архив. 5.5. Апарати и материали 5.5.1. Съдовете за провеждане на тестовете Могат да бъдат всякакви пластмасови, стъклени или керамични съдове, при условие, че нямат токсични емисии и са чисти от микроорганизми. 5.5.2. Приспособления за отброяване на семената За по- едрите, семена като Zea, Phaseolus , Pisum и др. обикновено се изполват маркирани плоскости с приблизителния размер на субстрата. С помоща на маркирите се постига равномерно разпределение на семената в субстрата. За по-дребните семена могат да се използват вакуумни приспособления за отброяване на необходимото количество за теста. Задължително условие е приспособлението да не сепарира семената по какъвто и да е начин. 5.5.3. Апарати за покълване 5.5.3.1. Якобсенов апарат Представлява уред с плоска работна повърхност върху която се поставят звънци (капаци). Семената се разполагат на повърхността на апарата, на субстрат хартия, и се похлупват със звънците. Звънците са с отвор за да се осигури аерация на семената и да се избегне излишна загуба на влага. Влагата се поддържа като под субстрата се поставят ленти от фиртърна хартия, чиито краища са потопени във водния резервоар на апарата. Температурата се подържа индиректно със загряване/охлаждане на водата в резервоара или директно чрез загряване/охлаждане на работната повърхност. Обикновено регулирането на температурата е автоматично. 5.5.3.2. Термостат Предствлява затворен шкаф със или без осветление и възможност за контрол и промяна на температурата в него. Модерните апарати са добре изолирани и обикновено са с функция за загряване, както и за охлаждане. Някои апарати могат да подържат предварително зададен режим на относителна влажност и в тях тестовете могат да се провеждат в отворени съдове, за разлика от другите апарати в които тестовете се провеждат задължително в затворени съдове/пликове. 5.5.3.3. Термостатна стая Представлява модификация на термостат, но е с по-големи размери и позволява залагане на много по-голям брой проби. 5.6. Процедура 5.6.1. Лабораторна проба Вземат се произволно четиристотин семена в повторения по 100 от добре размесеното чистото семе и се поставят равномерно и на разстояние едно от друго върху навлажненото кълнително легло. Повторенията могат да се разделят на по-малки повторения от по 50 или 25 семена в зависимост от размера на семената и необходимото разтояние между тях. Многокълновите семенни единици не се разделят при теста за кълняемост, а се разглеждат като единични семена.
Субстрата, температурата, времетраенето и допълнителни указания за третиране на семената в покой са посочени в Таблица 5А. За издаване на национален или ИСТА международен сертификат не могат да се използват никакви други условия. 5.6.2.1. Субстрат 5.6.2.1.1. Субстрат филтърна хартия TP на повърхността на филтърна хартия. Семената покълват на повърхността на пласт/пластове филтърна хартия, която се поставя в: - на работната повърхност на Якобсенов апарат - в термостат, в петрита, в прозрачни пластмасови или стъклени съдове. Хартията се намокря с предварително изчислено количество вода. За да се намали вероятността от изсушаване, съдовете за кълнене се поставят в термостата със затворени капаци или в затворени полиетиленови пликове. - директно в термостат с функция за подържане на режим на относителна влажност ВP – между два пласта филтърна хартия. Семената покълват между два пласта филтърна хартия, която се постига посредством:
- поставяне на семената върху един пласт филтърна хартия и свободно покриване с още един пласт и поставяне директно в термостат с функция за подържане на режим на относителна влажност РP – в плисирана филтърна хартия. Семената се поставят в плисирана филтърна хартия, обикновено по две семена в плисе. Препоръчва се шахматно зареждане на семената в плисетата за да има по-добро разпределение. Плисетата със семената се поставят в отворени или затворени кутии, в зависимост от вида на термостата. РP методът може да се използва като алтернатива, когато се изисква TP или ВP. 5.6.2.1.2. Субстрат пясък или органична среда Пясък или органична среда се използват по следния начин: TS- на повърхността на пясък , TO на повърхността на органична среда Семената се поставят на повърхността на описаните субстрати и леко се притискат . S- в пясък , O в органична среда Семената се поставят на повърхността на навлажнен пласт от субстрата и се покриват с 10-20 mm слои от същия субстрат без да се притискат. Пясък или органична среда могат да се използват като алтернативен метод, дори без да е посочено в Таблица 5А когато: - семената показват висока степен на заразеност с гъбни болести и не може да се извърши правилна оценка на кълновете - с цел потвърждаване на оценката на кълновете, ако е имало някакви съмнения - когато кълновете показват симптоми на фититоксичност в друг субстрат
Почвата не се препоръчва като субсрат. По принцип може да се използва като алтернатива на органичната среда когато кълновете показват симптоми на фитотоксичност в субстрат хартия или пясък. Ако се използва почва за събстрат тя трябва да отговаря на спецификацията в точка 5.4.2. 5.6.2.2. Влага и аерация По време на теста за кълняемост, на семената трябва да бъде осигурена постоянна влажност. Допълнително намокряне трябва да се избягва в случаите когато има вероятност за увеличаване на варирането между отделните повторения. Специални мерки по отношение на аерацията на семената при TP и РP не са необходими, когато се използват затворени кутии или петрита. При ВP, ролките трябва да са хлабаво поставени в пликовете за да имат достатъчно въздух. По същата причина не се притиска повърхностния слой при семената, покрити с пясък или органична среда.
Температурите, описани в Таблица 5А са тези, на които семената са подложени в субстрата или на повърхността му. Температурата трябва да се подържа постоянна по време на теста. Допустимите отклонения от предписаната температура трябва да се в рамките на ±2 ºС. Когато е предписан двустепенен режим на температура, ниската температура се поддържа за 16 часа, а високата за 8 часа. Преходът от едната към другата температура трябва да е плавен и в рамките на 3 часа. Когато е необходимо да се наруши покоят на семената може да се използва рязък преход в рамките на 1 час или семената директно да се преместят в друг термостат с предписаната температура.
Семената от повечето видове, за които е предписана светлина в Таблица 5А могат да покълват и натъмно. Но използването на светлина се препоръчва по принцип за да може да се постигне по-добро развитие на кълновете. Кълновете, покълвали при пълна липса на светлина са етиолирали и са по-уязвими на атаки от микроорганизми. А от друга страна дефекти на кълновете, като липса на хлорофил не могат да бъдат оценени. 5.6.2.5. Избор на метод Когато в Таблица 5А са предписани различни методи, може да се използва който и да е от тях. (възможни са всякакви комбинации от субстрат и температура) Изборът на метод зависи от опитът, условията и др. фактори в лабораторията. Когато семената показват незадоволителни резултати, те трябва да се анализират поне още веднъж, като се използва друг метод. 5.6.3. Третирания, подпомагащи кълненето Когато в края на периода на теста останат твърди или свежи семена, може да се проведе повторен анализ след просушаване или третиране, както е посочено в Таблица 5А Такова третиране може да се приложи и при първоначалния анализ, когато има съмнения за латентност (покой). За някои семена от дървесни видове и храсти, за които от опит се знае, че част от тях няма да покълнат поради латентност, се препоръчва едновременно с нормалния тест и втори тест, включващ специално третиране. За някои видове, упоменати в 5.6.3.1. до 5.6.3.3. се разрешава дезинфекция на семената преди теста. 5.6.3.1. Методи за нарушаване на физиологичния покой Сухо съхранение - за семената от видове, за които се знае, че имат кратък период на покой е достатъчно кратко съхранение на сухо място. Охлаждане – семената, готови за тест кълняемост се поставят първоначално при предписаната ниска температура и след това се преместват за да продължи теста, така както е предписано в Таблица 5А. За семената от полски, зеленчукови, цветни и медицински треви обикновено се поставят при температура между 5 ºС и 10ºС за период до 7 дни. В някои случаи е необходимо удължаване на периода или повтаряне на охлаждането. Загряване- семената за теста кълняемост се загряват със свободно циркулиращ въздух с температура 30ºС- 35 ºС за период до 7 дни, преди да се поставят при предписаните в таблицата условия. В някои случаи е необходимо удължаване на периода. Светлина – Когато в Таблица 5А е предписано използване на светлина се прилага осветление за 8 часа при по-високата температура. Светлината трябва да е 750 – 1250 lux от студена бяла лампа. Третиране с КNOз – Когато е предписано третиране с КNOз, субстратът се намокря с 0.2% разтвор на КNOз, вместо с вода. Разтворът се приготвя чрез разтваряне на 2g от химикала в 1 литър вода. Ако по време на теста има необходимост от допълнително навлажняване се изпозва вода. Третиране с гиберелинова киселина GAз – Това третиране се препоръчва главно за следните видове: Avena sativa, Hordeum vulgare, Secale cereale, x Triticosecale, Triticum aestivum и Valerianella locusta. Субстрата за кълнене се намокря с 0.05% разтвор на GAз, получен при разтваряне на 0.5 g от киселината в 1 литър вода. Когато семената на са в дълбок покой може да се използва 0.02% разтвор, при дълбок покой концентрацията може да е до 0.1%. Когато концентрацията на разтвора на гиберелинова киселина GAз е по-висок от 0.8% се препоръчва разтвора да се приготвя с участие на фосфатен буфер- 1.7799 g от Na2HPO4.2H2O и 1.3799 g от NaH2PO4.H2O се разтварят в 1 литър дестилирана вода. Затворени полиетиленови пликове – Когато в края на тест кълняемост са останали висок процент от свежи семена се препоръчва повтаряне на теста, като семената се поставят в затворени полиетиленови пликове, като мярка за провокиране на кълнене. 5.6.3.2. Метод за намаляване твърдостта на семената За много видове, при които се наблюдават твърди семена в края на теста, се препоръчва специфично третиране преди началото на теста или в края на теста за семената наличните твърди семена. Методите за третиране са накисване за 24-48 часа във вода. Тестът за кълняемост започва веднага след накисването. Механично надраскване, чрез продупчване, надраскване с шкуркаи др. на семенната обвивка. Най-доброто място за това механично надраскване е над върха на котиледоните. Намаляване здравината на семенната обвивка посредством накисване в концентрирана сярна киселина за от наколко минути до час. При Oryza sativa се използва еднонормална азотна киселина (HNO3) за 24 часа. 5.6.3.3. Метод за дезинфекция на семената Само за видовете Arachis hypogaea и Beta vulgaris може да се приложи третиране с фунгицид. На документа за лабораторен анализ се отбелязва името на препарата, процентното съдържание на активното вещество и метода на третиране. 5.6.4. Времетраене на анализа Времетраенето на теста за отделните видове е дадено в Таблица 5А.. Периодът на третиране, нужен, за да се прекъсне покоя преди или по време на теста не е включен в тестовия период. Ако в края на теста се вижда, че някои семена едва са започнали да кълнят, тестът може да се удължи със 7 дни или с до половината от времето на целия тест. Ако максималния капацитет на кълнене е постигнат преди края на теста, той може да бъде прекратен. 5.6.5. Оценка на кълновете Всеки кълн трябва да се оцени в съотведствие с основните принципи в Правила 5.2.3. и 5.2.4. За целта, основните структури трябва да са достатъчно развити, за да може да се открие наличие на аномалии. 5.6.5.1. Единични кълнове Кълновете, които са развити до степен в която всички основни стуктури са развити и могат да бъдат оценени, могат да бъдат отделени при първото или при последващи отчитания (ако има такива). Силно заболели или загнили кълнове също се отстраняват с цел намаляване на риска от заразяване на останалите семена, но ненормално покълналите могат да останат до края на теста. Кълновете се оценяват в субстрата в който са заложени за тестване. Ако по някаква причина, кълновете не могат да бъдат оценени, поради симптоми на фитотоксичност, се пристъпва към повторно тестване в пясък или органична среда с паралелно залагане на семена от проба за която се знае, че показва добри резултати за кълняемост.
Многокълновите семенни единици се броят като отделни единици и резултатът от теста показва % на единиците, които са образували поне един нормален кълн. При молба, може да се определи броя на нормалните кълнове, образувани от 100 семенни единици или броя семенни единици с 1, 2 или повече нормални кълна. 5.7. Повторно тестване Резултатите от тест кълняемост могат да бъдат оценени като не-добри и да се повтори теста при същите или при други условия когато: - счита се, че покоят на семената не е прекъснат - резултатите се оценяват като ненадеждни поради показани симптоми на фитотоксичност. При повторния тест може да се увеличи растоянието между семената, ако има необходимост. - счита се, че е допусната грешка при оценката или броенето на кълновете - когато разликите между повторенията са извън толерансите, в този случай, тестът се повтаря при същите условия. Ако и при втория тест резултатите по повторения са извън толерансите,но тестът е сравним с първоначалния, в документа за лабораторен анализ се посочва усреднения процент от двата теста. Ако при втория тест резултатите по повторения са извън толерансите, но тестът като цяло не е сравним с първоначалния, тогава се прави трети тест при същите условия и в документа за лабораторен анализ се посочва усреднен резултат от двата съпоставими теста. Когато тестът за кълняемост е повтарян в документа за лабораторен анализ се записва по-добрият резултат. 5.8. Изчисляване и изразяване на резултатите 5.8.1. Изчисляване Резултатите се изразяват в процент. Когато разликите между четирите повторения от по 100 семена в един тест са в рамките на допусимите толеранси, средната стойност представлява процентът кълняемост, който се съобщава в документа за анализ. Средният процент на нормално покълналите, ненормално покълналите, твърдите, свежите и мъртвите семена се закръглява до цяло число. (ХХ.25 части от процента се закръгляват на ХХ, докато ХХ.50 и ХХ.75 се закръгляват на ХХ+1 ) Сумата от процентите на нормално покълналите, ненормалнопокълналите и непокълналите семена трябва да е 100%. 1. Най- напред се изчислява процентът на нормално покълналите семена по повторения и средния им процент, като се спазва принципа на закръгление посочен по-горе. 2. Изчисляват се процентите на останалите категории. Събират се процентите за да се види сумата. 3. Ако сумата от процентите е 100, данните са окончателни и се записват в документа за лабораторен анализ. Ако сумата от процентите не е 100 се прави следното: 4. Намира се най-големият процент от ненормално покълналите, твърдите, свежите и мъртвите семена. Най-големият процент се закръглява нагоре, до цяло число. Това цяло число се приема за окончателен процент. 5. Изчисляват се останалите проценти и се проверява сумата. 6. Ако сумата от процентите е 100, данните са окончателни и се записват в документа за лабораторен анализ. Ако сумата от процентите не е 100 се повтарят стъпки 4 и 5. В случаи на равенсттво на десетичните части се следва следния приоритет: ненормално покълнали - твърди - свежи - мъртви семена Каталог: uploads -> files files -> Книга на етажната собственост (Загл изм. Дв, бр. 57 от 2011 г.) files -> П р е д у п р е ж д е н и е от Управителя/Управителния съвет files -> 10 години движение за социален хуманизъм files -> Категория : open, индивидуален смесен Хендикап : за жени 8 точки на игра Дати : от 06 октомври до 12 октомври 2008 files -> Xxxv редовна годишна среща „Регионални организации и местни органи 2016” files -> Списък на застрашените от изчезване местни сортове, важни за селскотостопанство files -> Наредба №4 от 11 март 2011 Г. За реда и условията за провеждане на конкурси за полски инспектори files -> Наредба №31 от 11 септември 2008 Г. За сертифициране на хмел и продукти от хмел и за регистриране на договорите за доставка на хмел files -> Рег.№ Име на фирмата Адрес на управление и телефон files -> Т е Х н и ч е с к о з а д а н и е технически изисквания и технически спецификации Изтегляне 3.01 Mb. Сподели с приятели:
|