Принципът на разделяне при тази хроматография се базира на разлики в молекулните им маси. Така могат да се разделят напр. смес от белтъци и следтова да бъдат определени техните молекулни маси. Тук като неподвижна фаза се използват органични полимери (напр. сефадекс), които образуват гел и притежават свойството да „пресяват“ разделяните от тях вещества. Наричат се още „молекулни сита“ или „молекулни филтри“. Най-бавно преминават през тези гелове веществата с най-малка молекули, защото проникват по-навътре в порите на полимера.
Афинитетна хроматография
Методът се основава на строго специфични взаимодействия, протичащи на повърхността на биологични макромолекули като напр. антиген-антитяло, хормон-рецептор, ензим-субстрат. Носители са различни производни на целулозата и други природни полимери, които се „натоварват“ с подходящите лиганди- съединения свързващи носителя с биологичните макромолекули. Този метод навлиза все по-широко в практиката и е наред с неговата безспорна селективност е също така много чувствителен, бърз и ефикасен.
Високоефективна течна хроматография (HPLC - High Performance Liquid Chromatography)
В нашето съвремие HPLC
автоматизирана и се
управлява
е напълно
чрез
специализиран софтуер. Една такава хроматографска система включва няколко блока: помпа, автоматичен инжектор (аутосамплер), термостат, в който се монтира хроматографската колона и детектор.
За постигане на добри аналитични цели (добро разделяне, идентификация и количествено определяне) е необходимо да се направи правилен подбор на подвижната фаза, неподвижната фаза (колонка с подходящ пълнеж и размери), както и детектор.
При описание на един HPLC метод е необходимо да се посочат хроматографските условия: колона (пълнеж, вътрешен диаметър, дължина; размер на частиците на пълнежа); температура на термостат; инжектиран обем; елуент; скорост на потока; хроматографско време (run time) и детектиране (вид детектор и избраните за целта настройки).
