Хроматографски методи за анализ
Тънкослойна хроматография
Изтегляне 464.79 Kb.
|
Свързани:
razvitie-na-biologichnoto-zemedelie-v-bylgariya
- Навигация на страницата:
- Разпределителна хроматография
- Йонообменна хроматография
Тънкослойна хроматографияТънкослойната хроматография (Thin Layer Chromatography - TLC) намира приложение в разделянето на вещества от техните смеси най- често с препаративна цел или за микроколичествен анализ. Тя е вид твърдо-течната хроматография: неподвижната фаза (наричана често адсорбент) е нанесена като тънък слой върху плáка (стъкло или друг инертен материал). Подвижната фаза (елуент) е разтворител или смес от разтворители. Сместа се нанася с капилярка върху стартовата линия (в долния край на плаката). След изсушаване на петната плаката се поставя напр. вертикално така че елуентът да омокри малка част от долния край на плаката без да покрива стартовата линия. В резултат на действащите капилярни сили елуентът се придвижва (пълзи) по височината на плаката и увлича анализираните вещества от сместа. Когато се достигне т.нар. фронт- линия малко преди крайния ръб на плáката, плáката се изважда, подсушава и проявява (петната от разделените вещества се визуализират). Проявяването (детектирането) може да стане или при облъчване с UV- лампа или чрез напръскване с проявител- реактив, който оцветява петната. Такива са напр. нинхидрин, бихромат в сярна киселина, ферихлорид, сребърен нитрат и пр. Разпределителна хроматографияРазпределителната хроматография се основава на разлика в коефицентите на рапределение на веществата в една смес при определена температура между двете фази. Тя може да бъде: 🠶 колонна 🠶 хартиена хроматография. Хартиената хроматография бива възходяща, низходяща, еднопосочна, двупосочна и радиална. Йонообменна хроматографияЙонообменната хроматография се основава на взаимодействие на противоположно заредени частици (йони) на разделяните вещества и неподвижната фаза, която е йонообменна (кисела или алкална) смола. В лабораторната практика чрез тази хроматография лесно и бързо се разделят аминокиселини и белтъци, чийто молекули при определено рН могат да получат Техниката на чрез колонна, „+“ или „-“ сумарен заряд. изпълнение може да бъде тънкослойна или хартиена хроматография. Процесът може да бъде напълно автоматизиран. Такива хоматографи, работещи на принципа на йонообменната колонна хроматография са например съвременните аминоанализатори. Изтегляне 464.79 Kb. Сподели с приятели:
|