Примери за илюстриране на процеса на класификация на тежестта, ежедневната оценка и оценката на действителната тежест



страница3/8
Дата13.05.2017
Размер0.96 Mb.
#21247
1   2   3   4   5   6   7   8

* Загубата на тегло от 35 % е пределен краен етап, който изисква сериозна научна обосновка. В този случай значителната загуба на тегло е неизбежна и животните могат да се възстановят от това с подходящата подкрепа, напр. допълнително затопляне и хранене, включително хранене от ръка, ако е необходимо. За това конкретно изследване краен етап от 35 % се определя като начин за намаляване на изискването за индуциране на ЕАЕ в допълнителни нетретирани животни, което ще бъде значително по-високо с „по-конвенционален“ краен етап (напр. 20 %).


Анализ
В случая за подходяща се счита ТЕЖКА прогнозна степен на тежест, тъй като се очаква процедурата да доведе до тежко влошаване на общото физическо и здравословно състояние на животните.

Може ли тежестта да бъде УМЕРЕНА?

Въпреки че поради описаните по-горе причини прогнозната тежест на този модел следва винаги да бъде ТЕЖКА, ретроспективната класификация на тежестта може да бъде УМЕРЕНА в зависимост от продължителността на изследването и прилагането на ранни хуманни крайни етапи, както е посочено тук.



Клинични наблюдения
По време на изследването мишките бяха наблюдавани от ветеринарния техник и персонала, грижещ се за животните, които използваха система от таблици за клиничните резултати, съобразени с протокола, след обсъждане с участието на ползватели, ветеринарни техници, персонала, грижещ се за животните, и ветеринарен лекар). Тя включваше параметри, свързани с теглото, състоянието на козината, тонуса на опашката, контрола на пикочния мехур, изправяне, вървеж, пареза и напреднали симптоми (заемане на странично положение при покой; почти пълна парализа; учестено, забавено или дълбоко дишане). Тъй като проектът включваше тежки процедури, животните бяха наблюдавани много внимателно и ползвателят редовно изготвяше текущи прегледи за степента на тежест след обсъждане с органа, отговарящ за хуманното отношение към животните, ветеринарен техник и назначен ветеринарен лекар. По-долу е представен илюстративен пример за таблица за резултатите.
Пример за подходяща таблица за резултатите
Таблица. Таблица за клиничните резултати, използвана за EAE при мишки

Дата:
















Външен вид

Телесно тегло
















Състояние на козината
















Телесна функция

Контрол на пикочния мехур
















Тонус на опашката
















Дишане
















Жизнена среда

Състояние на гнездото
















Поведение

Социално поведение
















Вървеж
















Специфични за процедурата показатели

Заемане на странично положение при покой
















Време за изправяне
















Пареза
















Парализа
















Други наблюдения

(Свободен текст)















Забележки: Всеки показател е оценен съгласно системата в таблицата по-долу, при която (например) „1“ ще бъде вписано в таблицата срещу „тонус на опашката“, ако се наблюдава намалено повдигане, а „2“ срещу „състояние на гнездото“, ако гнездото не е било достатъчно добре оформено.


Таблица. Система за оценка на показателите в таблицата за клиничните резултати за ЕАЕ


Резултат:

1 = Лека

2 = Умерена

3 = Тежка

Загуба на тегло

до 10 %

От 10 до 20 %

От 20 до 35 %

Състояние на козината

Леко рошава

Неподдържана

Значителна /продължителна пилоерекция

Контрол на пикочния мехур — инконтиненция

Доказателство за определена загуба на контрол, напр. малко количество урина в гнездото.

По-изразено „изпускане“ на урина

Инконтиненция

Контрол на пикочния мехур — задържане

Мехурът може да се палпира, но се изпразва при манипулация

Изискват се малко повече усилия за изпразване на мехура

Неспособен да уринира без намеса; признаци за дискомфорт/дистрес по време на или след ръчно изпразване

Тонус на опашката

Намалено повдигане или навиване на опашката

Загуба на тонус в дисталния край на опашката

Загуба на тонус по цялата дължина на опашката

Дишане: учестено, забавено или дълбоко дишане

Слабо

Умерено

Значително

Състояние на гнездото

Недостатъчно добре оформено

Има опит за създаване на гнездо, но не е достатъчно добре оформено

Няма гнездо

Социално поведение

Не се очаква промяна с наличие на леко страдание; оценяването започва при 2

Понижено взаимодействие с другите животни

Значително намалено взаимодействие, пасивен

Вървеж

Тромав

Влачи единия от задните си крайници

Влачи задните си крайници

Заемане на странично положение при покой

Не се очаква промяна с наличие на леко или умерено страдание; оценяването започва при 3

Не се очаква промяна с наличие на леко или умерено страдание; оценяването започва при 3.

Налице

Време за изправяне

Бавно изправяне при поставяне по гръб

Значително затруднение при изправяне

Неспособност да се изправи в рамките на 5 секунди след поставяне по гръб

Пареза

Слаба абдукция на предните крайници при поставяне по гръб

Намалена степен на абдукция на предните крайници при поставяне по гръб

Няма абдукция на предните крайници

Почти пълна или пълна парализа

Не се очаква промяна с наличие на леко или умерено страдание; оценяването започва при 3

Не се очаква промяна с наличие на леко или умерено страдание; оценяването започва при 3

Налице



Оценка на действителната тежест
В края на процедурата бе направен преглед на таблицата за резултатите за всеки индивид, за да се види колко високо са били оценени показателите и как това се е променило в течение на времето.


  • Две мишки загубиха 8 % от телесното си тегло след индуцирането на ЕАЕ, имаха леко рошава козина и лека абдукция на предните крайници, но показаха резултат „2“ по отношение на всички други показатели през първите пет дни от проекта. След това техният резултат бе върнат на „1“ или „0“ за всеки показател за пристъпната/ремитентната фаза и по време на изпитването на лекарството. Тежест=УМЕРЕНА

  • Три мишки загубиха между 22 и 32 % от телесното си тегло и показаха резултати в комбинация от „3“, „2“ и „1“ по време на пристъпната/ремитентната фаза и по време на изпитването на лекарството. Тежест = ТЕЖКА__Една_мишка_загуби_37_%_от_телесното_си_тегло_по_време_на_постиндукционната_фаза_и_бе_умъртвена_по_хуманен_начин._Тежест_=_ТЕЖКА'>ТЕЖКА

  • Една мишка загуби 37 % от телесното си тегло по време на постиндукционната фаза и бе умъртвена по хуманен начин. Тежест = ТЕЖКА

  • Две мишки загубиха 15 % и съответно 18 % от телесното си тегло и показаха резултат в комбинация от „2“ и „3“ за всички други показатели за първите четири дни от изследването. След това показаха резултат в комбинация от „1“ и „2“ по време на пристъпната/ремитентната фаза и по време на изпитването на лекарството. Тежест = ТЕЖКА

Не бе наблюдавана парализа и се оказа, че е много трудно да се оцени дишането на равнището на страничната стена на клетката, така че и двата показателя бяха изтрити от таблиците с данни. Увеличаването на прекараното в подслона време, отбелязано в полетата за свободен текст, е ранен показател за страдание, поради което той беше включен в таблиците за бъдещи проекти.


При 6 животни степента бе счетена за ТЕЖКА, при 2 животни — за УМЕРЕНА.

Възможности за допълнително прилагане на принципа на заместване, намаляване и облекчаване
След оценката на действителната тежест ползвателите проведоха консултации с колеги и потърсиха литература с цел по-нататъшни облекчения. Бяха отбелязани следните допълнителни облекчения:

  • предварително хранене на животните с високоенергийни хранителни добавки, като желе и кондензирано мляко, преди прилагане на адюванта;

  • използване на по-ниска доза адювант;

  • използване на алтернативен протокол за изследването, така че да бъде намалено времетраенето на проекта.

Тези възможности бяха добавени към протокола за бъдещи изследвания с намерението да се сравнят действителните равнища на тежест, за да се разбере дали облекченията са били ефективни.


Илюстративни примери за процеса на определяне на тежестта
Модел 3 — Артрит
Последна актуализация: 13 May 2017
Общ контекст
Животинските модели на артрит се използват за изследване на патогенезата на болестта и за оценка на потенциалните лекарства за артрит за клинична употреба. Следователно важният критерий за избор на модел включва морфологичните сходства с болестта при човека и капацитета на модела да предвижда ефикасността на изпробваните терапевтичните съединения при хората.
Широко използваните животински модели на ревматоиден артрит включват: адювантен артрит при плъх, колаген тип II за артрит при плъхове, колаген тип II за артрит при мишки и антигенно индуциран артрит при няколко вида (Bendele, 2001). Широко използвано е инжектирането в основата на опашката, тъй като то предоставя добър имуногенен отговор, въпреки че в литературата се съобщава и за други места за инжектиране. Също така има значителни различия в щамовете по отношение на чувствителност, тежест и латентност към появата на артрит. Например податливостта на генетично изменените (ГИ) линии по отношение на развитието на артрит може да бъде модифицирана (повишена или потисната) в зависимост от въздействието на генните изменения. При животинските модели на артрит, които са използвани често и поради това са добре утвърдени, настъпването на болестта ще бъде лесно предвидимо, а техниките за оценка е вероятно да бъдат добре дефинирани и характеризирани. При такива модели могат да се използват множество оценки, включително анализ на вървежа и използването на влакна Von Frey, които се различават от единичните мерки за наблюдение.
Трябва да се има предвид, че следва да се извършва редовен преглед на наличните щамове, протоколи и облекчения, така че да се избере/ат най-подходящия/ите от тях, изисквани с оглед на научните въпроси, разглеждани при всеки отделен случай (Joe et al, 1999).
Моделът, представен в настоящия пример, е колаген тип II за артрит при плъхове, който може да причини тежко страдание. Поради това за неговото използване е абсолютно задължително да е налице убедителна научна обосновка. Плъховете са имунизирани срещу хетероложен колаген тип II, който предизвиква лезии, подобни на тези, наблюдавани при ревматоиден артрит при човека (Bendele, 2001). Полученият полиартрит се характеризира със значително разрушаване на хрущяла, свързано с отлагане на имунен комплекс върху ставните повърхности, костна резорбция и периостална полиферация и достигане на по-умерени нива по отношение на подчертан синовит и околоставно възпаление.

Използвана литература

Bendele, A.M. Animal models of rheumatoid arthritis, J Musculoskel Neuron Interact 2001; 1(4):377-385

Jasemian Y et al. (2011) Refinement of the collagen induced arthritis model in rats by infrared thermography. Br. J. Med. & Med. Res.1(4): 469-477

Joe, B., Griffiths, M.M., Remmers, E.F., Wilder,R.L. Animal models of rheumatoid arthritis, Current Rheumatology Reports 1999 ; 1 139-149


Изследване
В настоящия пример артрит ще бъде индуциран в 18 мъжки и 18 женски плъха на Lewis чрез многократно инжектиране на непълен адювант на Freund (FIA) и колаген. Мястото на инжектиране ще бъде в основата на опашката. Ежедневното третиране ще започне след десет дни (Д 10), когато артритът вече ще се е развил, и след това ще продължи да се прилага ежедневно в продължение на 14 дни (до Д 24). Целта на изследването ще бъде да се тестват предполагаеми терапевтични агенти. За да се прецени дали осигуряването на аналгезия ще повлияе по някакъв начин върху научните цели, бе направен преглед на публикувани по-рано данни за свързани съединения и бе установено, че това ще доведе до объркване при експериментите. Поради това по време на развитието на артрита и при контролите няма да се прилага аналгезия, като по-специално ще се обърне внимание на нефармакологичните методи за облекчаване на болката (напр. облекчения при отглеждането), с цел да се облекчи страданието.
Всички животни ще бъдат наблюдавани и претегляни ежедневно, като резултатите ще се отбелязват в таблица за клиничните резултати и ще бъдат тествани на Д 0 (преди поставянето на първата инжекция), Д 10 (преди началото на третирането), Д 13, Д 16, Д 20 и Д 24. Тестването ще включва косвени мерки за увреждане на физическата функция, напр. диаметър на ставата (измерва се с дебеломер) и клиничния резултат, съгласно системата за оценяване по скала за артрит. Въз основа на клиничните резултати ще бъдат приложени хуманни крайни етапи (вж. по-долу).

Оценка на нови терапевтични фармацевтични агенти при модел на артрит при плъхове (колаген тип II)

Тежка степен на ТЕЖЕСТ

Какви действия спрямо животните са обхванати в настоящото изследване?

Какво ще изпитат животните? Колко страдание би могло да им бъде причинено? Какво би могло да доведе до влошаване?

Как страданието ще бъде сведено до минимум?

Неблагоприятни въздействия

Методология и интервенции

Крайни етапи



Подкожни инжекции на говежди колаген тип II в непълен адювант на Freund (FIA) в основата на опашката до три прилагания

Ограничен стрес

Краткотрайна болка, умерен оток на мястото на инжектиране и дискомфорт за един или два дни

Възможни кожни улцерации, но малко вероятно с FIA


Щадящо отношение и компетентност по време на манипулациите през цялата процедура

Стандартизирана доза и формулировка, избранa за максимално намаляване на отока и болката




Ако има кожни улцерации или те се инфектират, животното трябва да бъде умъртвено по хуманен начин


Развитие на артрит (Д0Д10)

Дискомфорт, болка, немощ и дистрес; животното може да покаже признаци за влошаване на здравето, включително унил външен вид, липса на апетит, нежелание за движение, загуба на тегло, отичане на ставите, доловима вокализация по време на манипулациите

Внимателно клинично наблюдение с използване на таблица за общите клинични резултати, с увеличена честота на наблюдение при проява на клиничните признаци (обикновено от Д8 до Д10).

Предоставяне на допълнителна мека постеля и материал за гнездене по време на цялото изследване

Лесен достъп до вода и храна (напр. на пода на клетката) по време на цялото изследване

Ще се използва система за клинично оценяване по скала за артрит, която оценява степента на отичане и броя на засегнатите стави



Когато животните достигнат предварително определения клиничен резултат за хуманни крайни етапи, те ще трябва да бъдат умъртвени по хуманен начин (вж. таблицата по-долу).

Прилагане на фармакологични агенти (тестване и контрол, два пъти дневно) подкожно или интраперитонеално

(от Д 10 до Д 24)

Краткотраен дискомфорт след инжектиране

Не се очаква фармакологичните агенти да причинят неблагоприятни въздействия предвид предишни данни за животни



Ежедневно внимателно клинично наблюдение с използване на таблица за общите клинични резултати

При наличието на значителни неблагоприятни въздействия ще се прилагат хуманни крайни етапи

Оценка на въздействието на фармакологичните агенти върху тежестта на артрита (Д 0, Д 10, Д 13, Д 16, Д 20 и Д 24)

В зависимост от използваните методи може да се наблюдава допълнителна краткотрайна болка или дискомфорт, напр. използване на влакна на Von Frey, използване на дебеломери, изискване за извършване на манипулации

Внимателно клинично наблюдение

Намаляване на честотата на наблюдение (до минимум, в съответствие с научните цели) до възстановяването на животните



Вж. таблицата по-долу



Забележка

Системите за клинично оценяване по скала и за оценяване по скала за артрит следва да бъдат обсъдени от научния изследовател, ветеринарния хирург, ветеринарния техник и персонала, грижещ се за животните, и да бъде постигнато съгласие по тях преди започването на изследването.


Анализ
В резултат на вероятността от значително клинично въздействие върху животното, което може да продължи в рамките на няколко седмици, се счита за подходящо прогнозната класификация на степента на тежест да бъде определена като УМЕРЕНА'>ТЕЖКА.
Може ли тежестта да бъде УМЕРЕНА?

Дали е възможно тежестта да бъде намалена до умерена зависи от целта на изследването. Например с често и задълбочено наблюдение на животните и при наличието на потенциал за изпълнение на по-ранни крайни етапи (напр. при възникване на окуцяване или след период на леко окуцяване при единия крайник, или използване на in-vivo образни методи за ранно откриване на промени в патологията на ставите), процедурата би могла да се класифицира като УМЕРЕНА. Такива ранни крайни етапи (напр. приключване на изследването на 6-ия ден, след образната диагностика) са възможни в проекти, при които се изследват ранни възпалителни промени. Профилактично лечение (започнало преди пълното развитие на артрита) с нови фармацевтични агенти, които имат силно противовъзпалително въздействие и потискат развитието на пълен артрит, също може да доведе до понижаване на тежестта до УМЕРЕНА. Вида на показаното тук изследване обаче има за цел да се направи оценка на леченията за напълно установен артрит, така че класификацията на степента на тежест се запазва ТЕЖКА.


Каталог: userfiles -> files
files -> Специална оферта за сезон 2015/2016 в Евридика Хилс Пампорово Нощувка със закуска
files -> Правила за условията и реда за предоставяне на стипендии за специални постижения на студентите във висшето училище по застраховане и финанси
files -> Наредба №111 от 12 октомври 2006 Г. За изпитване на продукти за растителна защита и одобряване на бази на физически и юридически лица
files -> Гарантирани вземания на работниците и служителите
files -> Гарантирани вземания на работниците и служителите
files -> I общи разпоредби Ч


Сподели с приятели:
1   2   3   4   5   6   7   8




©obuch.info 2024
отнасят до администрацията

    Начална страница