Анализ
Предвид размера на тумора, нарастването на опасността от образуване на рани, честотата на поставяне на инжекциите и неблагоприятните въздействия на дадените лекарства подходящата в този случай прогнозна класификация на тежестта е УМЕРЕНА.
Може ли границата на тежестта да бъде ЛЕКА?
Малко вероятно, освен в случаите когато научните цели могат да бъдат постигнати с по-ранни крайни етапи, например намаляване на максималния размер на тумора. Това също така би означавало инжектирането на лекарствата в дози, за които е известно, че не причиняват значителни неблагоприятни клинични въздействия. При тези условия ЛЕКА тежест може да бъде счетена за подходяща.
Клинични наблюдения
В края на този модел е включен пример за таблица за наблюдението и таблица за резултатите от образците.
Резултати
От 30 мъжки BALB/C мишки, 25 бяха използвани за оценка на ефикасността, на 10 животни бе дадено лекарство B при доза H, на 10 бе дадено лекарство B при доза X, а на 5 животни бе дадено лекарство C при доза Y;
Оценка на действителната тежест
-
3 животни не развиха тумори и бяха евтаназирани като неизползваеми за експеримента — ЛЕКА
-
2 животни получиха рани на мястото на инжектиране на тумора преди започване на лечението и бяха евтаназирани — УМЕРЕНА
-
при 10 животни, на които се дава лекарство B при доза H, се наблюдаваха тумори, които останаха относително малки, без значителна загуба на телесно тегло и без клинични признаци — ЛЕКА
-
при 7 животни, на които се дава лекарство B при доза X, се наблюдаваше намаляване на размера на тумора, 15 % загуба на телесно тегло и наличие на разстройство, но бяха запазени до края на експеримента — УМЕРЕНА
-
при 3 животни, на които се дава лекарство B при доза X, се наблюдаваше намаляване на размера на тумора, 15 % загуба на телесно тегло, наличие на разстройство, анорексия и бяха много летаргични. Те бяха умъртвени по хуманен начин на 25-я ден — ТЕЖКА
-
при 5 животни, на които се дава лекарство C при доза Y, се наблюдаваше продължаващо нарастване на размера на тумора, увеличена загуба на телесно тегло, без клинични признаци, различни от нарастването на тумора. Тези животни бяха евтаназирани, когато размерът на тумора надвиши 1,2 cm — УМЕРЕНА.
Пример за таблица за резултатите
Животно №
|
|
|
|
|
Дата
|
01/06
|
02/06
|
03/06
|
04/06
|
Външен вид
|
Телесно тегло
|
|
|
|
|
Състояние на козината
|
|
|
|
|
Телесна функция
|
Диспнея и/или тахипнея
|
|
|
|
|
Прием на храна
|
|
|
|
|
Жизнена среда
|
Разстройство или диария
|
|
|
|
|
Кръв в изпражненията
|
|
|
|
|
Поведение
|
Манипулации
|
|
|
|
|
Агресия
|
|
|
|
|
Нарушен вървеж
|
|
|
|
|
Нарушена стойка
|
|
|
|
|
Нежелание за движение
|
|
|
|
|
Специфични за процедурата показатели
|
Размер на тумора
|
|
|
|
|
Улцерация на тумора
|
|
|
|
|
Възпрепятствано от тумора движение
|
|
|
|
|
Общ резултат
|
|
|
|
|
Всякакви други наблюдения
|
|
|
|
|
Резултат_1'>Действия
|
Резултат 1
|
Преглед на честотата на наблюдение
|
2
|
Обмисляне на допълнителни грижи, напр. допълнително течности
|
4
|
Консултация с ветеринарен лекар
|
6
|
Прилагане на хуманен краен етап
|
Примери за клинични резултати
Външен вид
|
Резултат
|
Телесно тегло
|
5—10 % загуба на тегло
|
1
|
11—15 % загуба на тегло
|
2
|
16—20 % загуба на тегло
|
3
|
20 % + загуба на тегло
|
ХКЕ
|
Състояние на козината
|
Леко рошава козина
|
1
|
Лека пилоерекция
|
2
|
Значителна пилоерекция
|
3
|
Телесна функция
|
Тахипнея (учестено дишане)
|
1
|
Диспнея (затруднено дишане)
|
3
|
Жизнена среда
|
Разстройство или диария
|
1
|
Кръв в изпражненията
|
ХКЕ
|
Поведение
|
Напрегнатост и нервност по време на манипулациите
|
1
|
Значителен дистрес по време на манипулациите, напр. треперене, вокализация, агресивност
|
3
|
Движение
|
Леко нарушен/а вървеж/стойка
|
1
|
Значително нарушен/а вървеж/стойка
|
2
|
Значителни проблеми с придвижването / нежелание за движение
|
3
|
Неподвижност >24 h
|
ХКЕ
|
Специфични за процедурата показатели
|
Размер на тумора >1,2cm
|
ХКЕ
|
Улцерация на тумора
|
ХКЕ
|
Възпрепятствано от тумора движение
|
ХКЕ
|
Илюстративни примери за процеса на определяне на тежестта
Модел 2 — Експериментален автоимунен енцефалит (ЕАЕ) при мишки
Последна актуализация: 13 May 2017
Общ контекст
Експерименталният автоимунен енцефаломиелит (EAE) се използва за моделиране на различни аспекти на множествената склероза (МС) при гризачи и примати. МС е многостранно, комплексно неврологично разстройство, което се проявява при млади хора. Неговите симптоми включват възпаление, демиелинизация и аксонална загуба. Животинските модели се използват за изследване на физиопатологията на това заболяване, както и за оценка на възможните защитни или лечебни стратегии, включително имуномодулация, имунозащита, аксонална регенерация и възстановяване на миелина. Многостранните многофазови характеристики на МС изискват използването на подходящи модели за решаване на специфични въпроси, свързани с различни етапи на болестта.
ЕАЕ включва генериране на активност на имунната система, насочена към миелина, което предизвиква възпаление в централната нервна система и отваряне на кръвно-мозъчната бариера. Това може да доведе до тежък неврологичен синдром в животинския модел, който би следвало да бъде последван от частично възстановяване по време на първата хронична пристъпно-ремитентна фаза. Тази фаза е свързана с възпаление и обратима демиелинизация. След 9—10 седмици животното ще навлезе в прогресираща форма, която се характеризира с хронична демиелинизация и аксонална загуба. По време на тази фаза е възможно да се направи оценка на различните терапевтични стратегии. Хуманните и научните крайни етапи трябва да бъдат избрани много внимателно, като се вземат под внимание целите на изследването.
Използвана литература
Emerson MR et al. (2009) Enhancing the ability of Experimental Autoimmune Encephalomyelitis to serve as a more rigorous model of Multiple Sclerosis through refinement of the experimental design. Comparative Medicine59: 112-128
Miller SD et al. (2010) Experimental Autoimmune Encephalomyelitis in the mouse. Current Protocols in Immunology.88: 15.1.1 – 15.1.20
Weissert R (ed) (2012) Experimental Autoimmune Encephalomyelitis - Models, Disease Biology and Experimental Therapy. Published byIn Tech, DOI: 10.5772/1190, http://www.intechopen.com
Wolfensohn S et al. (in prep) Reducing suffering in Experimental Autoimmune Encephalomyelitis.
Изследване
В този пример EAE ще бъде индуцирана в четири мъжки и четири женски Biozzi ABH мишки (широко използван щам, за който се счита, че има висока транслационна стойност), с цел да се направи оценка на възможна терапия за МС. В началния етап на планиране на проекта при обсъждане, включващо ветеринарния техник, персонала, грижещ се за животните, както и лекуващия ветеринарен лекар, ползвателят разглежда всяко възможно нежелано събитие за животните и определя евентуалните причини за страдание. Всички те проучват облекченията и те се въвеждат в проекта. В социално отношение мишките ще бъдат настанени в еднополови групи от по четири мишки. Особено внимание ще бъде обърнато на местната среда, тъй като животните с ЕАЕ ще бъдат със значителни двигателни дефицити. В клетките ще бъде осигурена твърда настилка, дървени стърготини за постилане, подходящ материал за подслон и за гнездене, както и блокчета за гризане. Животните ще бъдат третирани с възпалителен адювант, за да се предизвика ЕАЕ, и ще бъдат наблюдавани по време на фазата на възстановяване и хроничната пристъпно-ремитентна фаза (от 9-та до 10-та седмица). След като бъде развита прогресиращата форма, изпробваните терапевтични съединения ще бъдат оценявани при мишки, намиращи се в третата седмица от изследването.
Първоначална прогнозна оценка и разглеждане на специфични облекчения и хуманни крайни етапи
Какви действия спрямо животните са обхванати в настоящото изследване?
|
Какво ще изпитат животните? Колко страдание би могло да им бъде причинено? Какво би могло да доведе до влошаване?
|
Как страданието ще бъде сведено до минимум?
|
Неблагоприятни въздействия
|
Методология и интервенции
|
Крайни етапи
|
Многократно поставяне на инжекции с възпалителен адювант
|
Дискомфорт или болка в резултат на първоначалното инжектиране.
Възможна реакция на мястото на инжектиране, причиняване на дразнение или дискомфорт
|
В множество подкожни области (без лапичките или основата на опашката) ще бъдат инжектирани малки дози.
Адювантът и носителят са формулирани така, че да предизвикват минимално дразнение
След инжектирането животните ще бъдат наблюдавани
|
Животните ще бъдат умъртвени по хуманен начин, ако след инжектирането се наблюдава повече от краткотрайна умерена болка или дистрес
|
Индуциране на EAE — първоначален тежък неврологичен синдром, последван от фаза на възстановяване
|
Парализа, която може да причини дистрес или безпокойство: загуба на тонус на опашката, слабост в задните крайници, хипомотилитет, парализа на крайниците, урологична дисфункция (инконтиненция или задържане)
|
Урологичната функция ще бъде наблюдавана, като ще се следи ежедневно състоянието на пикочния мехур. В случай на задържане пикочният мехур ще бъде изпразван ръчно (наблюдавайте внимателно за признаци за болка или дистрес след изпразване на мехура)
Ако животните са инконтинентни, клетката ще бъде проверявана често за влажен постелъчен материал или материал за гнездене; при необходимост поставете нови материали
Ще бъде осигурен подходящ подслон и материал за гнездене
|
Хуманни крайни етапи за всеки един от следните критерии:
-
Двустранна парализа на предните крайници >24 ч.
-
Двустранна парализа на задните крайници в продължение на до 5 дни
-
Всякакво самоосакатяване
-
Продължително задържане на урина/Неспособност за изпразване на мехура
-
Пареза (загуба на подвижност; лека парализа)
-
Загуба на тегло от 35 %*
-
Отказ да яде или пие за >24 ч. след настъпване на заболяването
-
Липса на възстановяване от EAE 3 седмици след настъпване на клиничното заболяване
-
Клинични признаци за развиващо се съпътстващо заболяване, напр. изгърбване
|
Значителна загуба на тегло (напр. до 35 %)
|
Ще бъде осигурен постоянен достъп до вода и храна, разположени в контейнери на пода на клетката.
Телесното тегло и състоянието ще бъдат наблюдавани ежедневно и след започване на загубата на тегло промените ще бъдат отбелязвани по-често (ако е необходимо).
Ще бъдат осигурени блокчета, напоени с храни и течности, като ще бъдат допълвани подкожно, когато е необходимо
|
Пристъпно/ремитентно клинично развитие
|
Хроничен неврологичен дефицит
|
Всички стресови фактори ще бъдат намалени, включително нивата на шума
При необходимост температурата на жизнената среда ще бъде повишена, като се използват затоплящи подложки, допълнителна постеля и материали за гнездене
|
Прилагане на нов терапевтичен агент (по време на прогресиращата форма)
|
Дискомфорт вследствие на инжектирането
Странични ефекти или липса на ефикасност на агента
|
След инжектирането на изпробвания агент животните ще бъдат наблюдавани внимателно
|
Животните ще бъдат умъртвени по хуманен начин, ако се наблюдава някой от посочените по-горе показатели или ако са налице някакви тежки странични ефекти в резултат на новия терапевтичен агент
|
Сподели с приятели: |
