III.2.1.2 Използване на вещества, белязани с радиоактивен изотоп
Използването на вещества, белязани с радиоактивен изотоп, за изпитване може да улесни аналитичните измервания във вода и при риби. Въпреки това, освен ако не са комбинирани със специфичен аналитичен метод, общите измервания за радиоактивност потенциално отразяват наличието на изходното вещество, както и възможния(ите) метаболит(и) и възможния метаболизиран въглерод, които са включени в органичните молекули на тъканите на риби. Поради тази причина стойностите на BCF, определени чрез използването на вещества, белязани с радиоактивен изотоп за изпитване, обикновено се надценяват.
При използването на вещества, белязани с радиоактивен изотоп, маркирането най-често се поставя в подходящата част на молекулата, поради което измерваната стойност на BCF включва BCF на метаболитите, както и BCF на изходното вещество. За някои вещества именно метаболитът е най-токсичен или притежава най-висок потенциал за биоконцентрация. Ето защо селективните измервания едновременно на изходното вещество и на метаболитите може да са важни при тълкуването на опасността за водната среда (включително потенциала за биоконцентрация) на такива вещества.
При експерименти, при които се използват вещества, белязани с радиоактивен изотоп, често се установяват високи концентрации на радиоактивен изотоп в жлъчния мехур на риби. Счита се, че това се дължи на биотрансформация в черния дроб и впоследствие на отделяне на метаболити в жлъчния мехур (Comotto et al., 1979; Wakabayashi et al., 1987; Goodrich et al., 1991; Toshima et al., 1992).
Факторът на биоконцентрация от проучвания с вещества, белязани с радиоактивен изотоп, е за предпочитане да се базира на изходното съединение. Ако такъв не е на разположение, за целите на класифицирането може да се използва фактор на биоконцентрация, основаващ се на общите остатъци от радиоактивни изотопи. Когато факторът на биоконцентрация по отношение на остатъците от радиоактивни изотопи е > 1000 е силно препоръчително да се идентифицират и определят количествено продуктите на разграждане, документирани като > 10 % от общите остатъци в тъканите на риби в устойчиво състояние.
Когато рибите не се хранят, съдържанието на жлъчния мехур не се изпразва в червата и в жлъчния мехур може да се образуват високи концентрации на метаболити. По този начин режимът на хранене може силно да повлияе измерената стойност на BCF. В литературата се срещат много изследвания, при които се използват съединения, белязани с радиоактивни изотопи, и при които рибите не се хранят. При тези изследвания биоконцентрацията може в повечето случаи да е надценена.
ІІІ.2.2 Коефициент на разпределение октантол/вода (Kow)
За органични вещества експериментално получените висококачествени стойности на коефициента на разпределение октанол/вода (Кow) са за предпочитане пред други определени стойности на Kow. Когато не са на разположение висококачествени експериментални данни, за целите на класифицирането могат да се използват валидирани количествени зависимости структура-активност (QSARs) за определяне на Kow. Такива валидирани QSARs могат да бъдат използвани без да се променят приетите критерии, ако те са ограничени до химични вещества, за които тяхната приложимост е добре характеризирана. За вещества, като силни киселини и основи, вещества, които реагират с елуент, или повърхностноактивни вещества, се използва изчислената с помощта на QSAR стойност на Kow или оценка въз основа на отделните н-октанол и вода разтворимости, вместо аналитично определената стойност на Kow. Измерванията върху йонизируеми вещества се извършват в тяхната нейонизирана форма (свободна киселина или свободна основа) само с помощта на подходящ буфер с pH под pK за свободна основа или над pK за свободна киселина. Ако има многобройни данни за Kow за едно и също вещество, преди да се избере една стойност трябва да се разгледат причините за различията. По принцип най-високата валидна стойност има предимство. Допълнителна информация е предоставена в подраздел 7.1 на раздел R.7A от IR/CSA. Насоки относно коригирането на pH на йонизируеми вещества са дадени в подраздел 7.1.20.
III.2.2.1 Експериментално определяне на Kow
За експериментално определяне на стойностите на Kow са описани няколко различни метода в стандартните ръководства. В раздел R.7A от IR/CSA се съдържат насоки относно методите за директно измерване (метод на разклащането в стъкленица [Shake Flast Method], метод на образуването на колона [Generator Column Method] и метод на бавното разбъркване [Slow Stirring Method]) и един метод за косвено измерване (метод на хроматографията с обърната фаза [Reverse Phase HPLC Method]).
III.2.2.2 Използване на количествени зависимости структура- активност (QSAR) за определяне на Kow
При установяване на изчислена стойност на Kow е необходимо да се разгледа методът на изчисление. За изчисляването на Kow са разработени и продължават да бъдат разработвани многобройни количествени зависимости структура-активност. Изчисленията на първите шест програми, извършени през 2007 г., са показани в таблица III.2.2.2 по-долу. Препоръчително е при прогнозирането на Kow да се използва поне една от посочените по-долу софтуерни програми. Когато е възможно се взима под внимание средната от няколко прогнози. Повече насоки са дадени в подраздел 7.1.8.3 на раздел R.7A от IR/CSA.
Таблица II.2.2.2 Примери за софтуерни програми за изчисляването на коефициента на разпределение октанол/вода (Kow) (подраздел 7.1.8.3 на раздел R. 7A от IR/CSA)
Софтуер
|
Уебсайт
|
Наличност
|
Партидна операция
|
Прогнозен % в рамките на коеф. 0.5
|
Стандартна грешка
|
ADMET
|
www.simulationsplus.com
|
Може да се закупи
|
Да
|
94.2
|
0.27
|
ACDLabs
|
www.acdlabs.com
|
Може да се закупи
|
Да
|
93.5
|
0.27
|
ChemSilico
|
www.logp.com
|
Може да се използва безплатно
он лайн
|
Не
|
93.5
|
0.30
|
LOG KOWWIN
|
www.epa.gov/oppt/exposure/pubs/ episuitedl.htm
|
Може да бъде изтеглена безплатно от интернет
|
Да
|
89.1
|
0.34
|
SPARC
|
ibmlc2.chem.uga.edu/sparc
|
Може да се използва безплатно
он лайн
|
Не
|
88.5
|
0.33
|
ClogP
|
www.daylight.com
|
Може да се закупи
|
Да
|
88.4
|
0.29
|
Сподели с приятели: |