Примери за илюстриране на процеса на класификация на тежестта, ежедневната оценка и оценката на действителната тежест
Изтегляне 0.96 Mb.
|
- Навигация на страницата:
- 2.1.4 Анализ на резултатите Оценка на действителната тежест
- Като обобщението може да се счита, че ГИ мишки имат безвреден фенотип. Развъждането на установени линии не изисква разрешение за проекта съгласно Директивата. 2.2
- Модел на генетично изменена мишка — Tg( ген B)
- Какви действия спрямо животните са обхванати в настоящото изследване
- Как страданието ще бъде сведено до минимум Неблагоприятни въздействия Методология и интервенции
- Крайни етапи Оценка и характеристика на развитието на тумора
- 2.2.4 Анализ на резултатите Оценка на действителната тежест
- 2.3 Модел на генетично изменена мишка — ген C tm1a(Funding)Lab 2.3.1 Общ контекст
- 2.3.4 Анализ на резултатите
|
Клинични наблюдения Всички наблюдения и съотношения по отношение на новородените малки при отбиване бяха счетени за нормални във връзка с генетичния произход от (C57BL/6N) с хомозиготни, хетерозиготни и диви видове мишки, родени при нормално Менделово съотношение. На четириседмична възраст хомозиготни и диви видове контролни мишки (7+7) бяха подложени на серия от наблюдения и леки процедурни тестове, напр. SHIRPA, дисморфология, открито поле, кръвна клинична химия, DEXA и Faxitron изображения около 16-та седмица. В края на този експеримент анализът на фенотипа показа намаляване на клирънса на глюкозата при хомозиготни мишки след интраперитонеален глюкозотолерантен тест (ipGTT). Въпреки че по време на теста клирънса на глюкозата бе намален, след процедурата всички животни се върнаха към тяхното основно състояние и не бяха отчетени по-нататъшни неблагоприятни въздействия. 2.1.4 Анализ на резултатите Оценка на действителната тежест След създаването ѝ при отглеждането и нарастването на колонията са използвани хетерозиготни мишки и котила от див вид. При нито една от мишките, използвани за развъждане и отглеждане, не са наблюдавани вредни фенотипове, така че се счита, че не са проявени неблагоприятни ефекти. Тъй като не се очаква вреден фенотип, тази линия би могла да бъде направена хомозиготна и да се отглежда без разрешение за проекта. Горепосоченото чифтосване на хетерозиготни с хетерозиготни мишки, води до появата на хомозиготни мишки. Група от тези мишки бе използвана за стандартна проверка на образуване на фенотип, състояща се от поредица от леки протоколи, включително вкарване на игла за вземане на кръвни проби при глюкозотолерантен тест. При извършване на тестовете бе осъществен и контрол на дивите видове. Кумулативното въздействие върху мишките би следвало да бъде леко в резултат на вземането на кръвни проби и последващите процедури за определяне на фенотипа, за разлика от общото въздействие на генетичните изменения. Обобщение Развъждане и отглеждане — няма неблагоприятни въздействия Хомозиготни мишки + контролни мишки — ЛЕКО — по силата на скрининговите тестове (а не на въздействието на генетичните изменения) Като обобщението може да се счита, че ГИ мишки имат безвреден фенотип. Развъждането на установени линии не изисква разрешение за проекта съгласно Директивата. 2.2 Модел на генетично изменена мишка — Tg(ген B)Labcode 2.2.1 Общ контекст Колония от мишки, които имат мутация, свръхекспресираща трансген, ще бъде създадена като модел за изследване на форма на рак. Линията ще бъде създадена с произход от C57BL/6N. Проявата и темповете на развитие на тумора обаче не могат да бъдат определени и ще се изисква оценка като част от характеристиката на модела. След като бъдат установени основните линии, ще бъде извършена основна скринингова оценка на хуманното отношение, както е описано в раздел 2.1. Най-полезната линия ще бъде подобрена за изследване на този тип левкемия. 2.2.2 Прогнозна оценка
Изследваният модел ще бъде подложен на мутация, за да се създаде прогнозирано генетично заболяване. Настъпването на заболяването не може да бъде лесно прогнозирано, но клиничните признаци могат да бъдат определени предварително, за да позволят настъпването да бъде характеризирано. Веднъж характеризиран, моделът ще трябва да бъде поддържан, за да се позволи използването му по време на последващи експериментални изследвания относно възможните видове лечение на този вид рак, подложен на изследване. Въз основа на това този пример ще бъде класифициран като УМЕРЕН. 2.2.3 Резултати Оценките на хуманното отношение към животните бяха извършени съгласно раздел 2.2 по-горе. Не бяха открити аномалии в основните етапи на развитие, установен бе растеж до достигане на полова зрялост. Колонията бе увеличена с източници и животни за бъдещо развъждане, чифтосани на десетседмична възраст, за да се поддържа колонията и да се създават нови експериментални животни. През цялото това време животните бяха под наблюдение и бе отбелязано, че има развитие на тумора на възраст 18 седмици при 60 % от животните, носители на мутацията. Клиничното развитие на болестта бе между 4 и 6 седмици, като на този етап животните трябваше да бъдат евтаназирани. 2.2.4 Анализ на резултатите Оценка на действителната тежест При 60 % от животните, които са носители на мутацията, беше наблюдавано развитие на тумори от възраст 18 седмици. Съгласно стратегията за развъждане животните се чифтосваха след навършване на 10-седмична възраст. Възможността за развитие на тумори при размножаващи се двойки бе счетена за достатъчна, за да се промени развъждането и отглеждането. Поради това двойките за размножаване бяха чифтосани от 6-седмична възраст, а двойки, отделени от 12-седмична възраст с отглеждани за разплод мъжки, бяха умъртвявани. Източниците и женските животни за разплод бяха наблюдавани ежедневно, за да се открият ранни признаци за развитие на тумора. Животни, които не бяха използвани или необходими, се умъртвяваха по хуманен начин преди настъпването на който и да е от клиничните признаци. Обобщение Животни под 18-седмична възраст — без неблагоприятни въздействия. Животни на възраст от 18 седмици, развиващи тумори — ЛЕКА поради ранните клинични крайни етапи Животни на възраст от 18 седмици, развиващи тумори, и потомци за използване — ЛЕКА или УМЕРЕНА в зависимост от прилагането на клиничните крайни етапи. 2.3 Модел на генетично изменена мишка — ген Ctm1a(Funding)Lab 2.3.1 Общ контекст За тестване на поведението и паметта бе създадена колония мишки с мутация в ген C, насочена към линия от ембрионални стволови клетки, които са с произход от C57BL/6N с известен фенотипен потенциал. Този модел бе поддържан въз основа на определен произход (C57BL/6N). След като бе установено прехвърлянето на зародишната линия на G1 мишки, бе проведена и основна скринингова оценка на хуманното отношение. 2.3.2 Прогнозна оценка Както бе отбелязано в раздел 2.1, изследваният ген е нов мутант. Намерението е моделът да се използва при бъдещи изследвания на поведението, като се тества ефикасността на нови фармацевтични съединения. Опитът при такъв вид установяване показва, че голяма част от подобни на този модели обикновено проявяват лек фенотип. Понякога в модела обаче ще се проявяват неочаквани клинични признаци и следователно въз основа на това този пример може прогнозно да бъде класифициран като УМЕРЕН. 2.3.3 Резултати Всички наблюдения и съотношения бяха счетени за нормални във връзка с генетичния произход (C57BL/6N) на модела с хомозиготни, хетерозиготни и диви видове мишки, родени при нормално Менделово съотношение. Когато хомозиготните и дивите видове контролни мишки достигнаха 4-седмична възраст, бяха подложени на серия от наблюдения и бяха тествани, за да се оцени способността им за учене и паметта. Тези тестове бяха проведени в периода около 10-ата седмица. В края на този фенотипен анализ не се наблюдаваха вредни фенотипи. След това моделът бе използван за тестване на ефикасността на нови фармацевтични съединения. Развъждането на хетерозиготни мишки доведе до появата на здрави хомозиготни животни, които показват репродуктивна способност, подобна на тази на основния щам. Поради това за намаляване на броя на животните бе използвана стратегия за развъждане чрез хомозиготни чифтосвания. За разлика от първоначалното чифтосване, при което хомозиготни мишки се получават от чифтосване на хетерозиготни с хетерозиготни, новата група хомозиготни животни е произлязла от чифтосването на хомозиготни родители, които видимо са по-дребни и не са успели да достигнат нормалния за тях размер и тегло в сравнение с техните братя и сестри. Въпреки че първоначално линията бе предназначена за модел на поведение и памет, бяха проведени допълнителни анализи на тъкани и кръв, получени от тези животни. По време на анализа на резултатите от биохимичния анализ на кръвта и последващия преглед на литературата бе установено, че ген C се явява важен транспортиращ протеин, който се свързва с витамин B12. Премахването на ген C води до прекъсване в извънклетъчния транспортен механизъм, което води до нарушение в синтеза на ДНК и метаболизма на мазнини и протеини. Ефектът от тази мутация не би бил видим при мишки, родени от хетерозиготни женски, тъй като майчиният източник на витамин B12 се прехвърля в утробата чрез плацентата до развиващия се зародиш. Следователно първоначалните мутанти за този ген имат достатъчно съхранен B12, което им позволява да оцелеят и да се развият до 16-седмична възраст, което гарантира нормално развъждане и плодовитост в сравнение с основния щам. 2.3.4 Анализ на резултатите Оценка на действителната тежест Този пример показва, че отглеждането на колонията може да има дълбок и често пъти неочакван ефект върху мишките. Въз основа на наличната по-рано информация и резултатите от първичното развъждане и определяне на фенотипа тази колония би се проявила като незабележима. Логично е отглеждането на колония при стратегия за хомозиготно чифтосване нормално да гарантира, че е създаден минималният брой животни, което е желателно, за да се сведе до минимум използването на животни. Без разрешение за проекта е възможно в линии, поддържани преди като нормални животни, да възникнат непредвидени вредни фенотипи. В резултат на неблагоприятните въздействия върху хуманното отношение към животните в този пример вероятно ще е необходимо този модел да бъде върнат в рамките на разрешението за проекта, ако се прилага този вид схема на развъждане. Обобщение Развъждане и отглеждане на хетерозиготни двойки — няма неблагоприятни въздействия Развъждане и отглеждане на хомозиготни двойки — УМЕРЕНА тежест за потомците на това поколение поради по-дребния размер и неспособността на пораснат. Пример 2.3 — Подчертава нуждата от прехвърляне на точни и полезни данни за хуманното отношение между институтите, когато могат да се проявят вредни фенотипи, например под формата на „паспорт на мишка“i. 1http://ec.europa.eu/environment/chemicals/lab_animals/pdf/Consensus%20doc%20on%20severity%20assessment.pdf i RSPCA GA Passport Working Group (2010) GA Passports: The Key to Consistent Animal Care. Southwater, UK: RSPCA (download at http://www.rspca.org.uk/sciencegroup/researchanimals/implementing3rs/gapassport) Каталог: userfiles -> files files -> Специална оферта за сезон 2015/2016 в Евридика Хилс Пампорово Нощувка със закуска files -> Правила за условията и реда за предоставяне на стипендии за специални постижения на студентите във висшето училище по застраховане и финанси files -> Наредба №111 от 12 октомври 2006 Г. За изпитване на продукти за растителна защита и одобряване на бази на физически и юридически лица files -> Гарантирани вземания на работниците и служителите files -> Гарантирани вземания на работниците и служителите files -> I общи разпоредби Ч Изтегляне 0.96 Mb. Сподели с приятели:
| |||||||||||