В момента не съществуват одобрени от ОИСР in vitro/ex-vivo изпитвания за сериозно увреждане/дразнене на очите. Въпреки това, в ЕС е регулаторно прието, че дадено вещество може да се счита за сериозен дразнител за очите (сериозно увреждане на очите от категория 1) въз основа на положителни резултати от тест върху изолирано око пилешко око (ICE), тест на непрозрачност и пропускливост на говежда роговица (BCOP), тест върху изолирано заешко око (IRE) или тест върху хориоалантоинова мембрана на кокоше яйце (HET- CAM). При отрицателни in vitro резултати за корозия трябва да бъдат проведени допълнителни изпитвания (раздел R.7.2.4.1 от IR/CSA)
В момента не съществуват регулаторно одобрени изпитвания in vitro за дразнене на очите, но два модела на човешки роговичен епител са представени на Европейския център за утвърждаване на алтернативни методи за утвърждение.
3.3.2.1.2.5 Методи за изпитване: данни in vivo
Изпитвания за дразнене на очите не би трябвало да се провеждат за вещества, за които е известно или се очаква да са корозивни за кожата. Такива вещества автоматично се считат за сериозно увреждащи очите. Не се изисква паралелна класификация за сериозно увреждане на очите в допълнение към корозия на кожата.
Изпитването in vivoвърху зайци съгласно Указание за изпитване 405 на ОИСР (B.5 от Регламента за методите за изпитване), е стандартно изпитване за оценка на опасността съгласно REACH.
Тестът за очите върху малък обем (LVET; Griffith et al 1980) е модификация на стандартното Указание за изпитване 405 на ОИСР, като разликите са следните:
материалът за изпитване се поставя директно върху роговицата, вместо да се въвежда в конюнктивалната торбичка от вътрешната страна на долния клепач;
намаляване на обема на използвания материал за изпитване (0.01 мл (или съответното тегло за твърди вещества), в сравнение със стандартните 0.1 мл).
Данните от LVET следва да се разглеждат, но трябва внимателно да се оценяват. Валидираната област до този момент се ограничава до перилни препарати и почистващи продукти. Установено е, че положителните данни са предпоставка за подходящо класифициране, но че отрицателните данни не са окончателни за некласифициране. (раздел R.7.2.4.1 от IR/CSA). Въпреки това, те трябва да се разглеждат при определянето на значимостта на доказателствения материал.
Приложение I, параграф 3.3.2.6.Необратими ефекти за очите/сериозно увреждане на очите (категория 1)
3.3.2.6.1. Веществата, които имат потенциал за сериозно увреждане на очите, се класифицират в категория 1 (необратимо увреждане на очите). Веществата се класифицират в тази категория на опасност на база на резултатите от изпитванията върху животни, проведени в съответствие с критериите, изброени в таблица 3.3.1. Тези наблюдения включват животни с увреждане на роговицата 4 степен и други сериозни реакции (напр. разрушаване на роговицата), наблюдавани по всяко време в хода на провеждане на изпитванията, както и крайна непрозрачност на роговицата, обезцветяване на роговицата, причинено от багрилно вещество, адхезия, панус и нарушаване на функцията на ириса или други последици, които увреждат зрението. В този контекст за трайни увреждания се считат такива, които не са напълно обратими в рамките на периода на наблюдение, обикновено продължаващ 21 дни. Веществата се класифицират в категория 1 и ако удовлетворяват критериите за непрозрачност на роговицата ≥ 3 или ирит > 1,5, което се установява при провеждане на теста на Дрейз (Draize eye test) върху очите на заек, като се отчита факта, че такива сериозни увреждания обикновено не се възстановяват в течение на периода на наблюдение в продължение на 21 дни.
Таблица 3.3.1
Категория за необратими ефекти върху очите
Категория
Критерии
Необратими ефекти
върху очите
(категория 1)
Ако при съприкосновение с очите на животно дадено вещество причинява:
- поне при едно животно има ефекти за роговицата, ириса или конюнктива, които не се очаква да са обратими или не са напълно обратими в течение на обичаен период на наблюдение с продължителност 21 дни;
и/или
- поне при 2 от 3 животни, върху които е проведено изпитване, се наблюдава положителна реакция:
- непрозрачност на роговицата ≥ 3 и/или
- ирит > 1,5
изчислени като средни резултати, получени при разпределени в серии изпитвания на 24, 48 и 72 часа след поставянето на изпитвания материал.
Приложение I, параграф 3.3.2.7. Обратими ефекти върху очите (категория 2)
3.3.2.7.1. Веществата, които имат потенциала да причиняват обратимо дразнен на очите, се класифицират в категория 2 (Дразнене на очите).
Таблица 3.3.2
Категорияза обратими ефекти върху очите
Категория
Критерии
Дразнене на очите
(категория 2)
Ако при прилагане върху очите на животно веществото предизвиква:
- поне при 2 от 3 животни, върху които е проведено
разпределени в серии изпитвания на 24, 48 и 72 часа след поставянето на изпитвания материал, и които се възстановяват напълно в рамките на периода на наблюдение от 21 дни.
3.3.2.7.2. За веществата, при които има ясно изразена променливост в реакциите на животни, тази информация се взема предвид при определянето на класификацията.
Критериите за класифициране се прилагат за резултатите от Указание за изпитване 405 на ОИСР и резултатите от изпитване LVET. Отрицателните резултати от LVET не са окончателни за некласифициране, но трябва да се разглеждат при определянето на значимостта на доказателствения материал.